Coloration de Ziehl-Neelsen
La coloration de Ziehl-Neelsen est une méthode de coloration donnant la possibilité l'identification des mycobactéries au microscope.
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- et un examen cytologique après coloration par la technique de .... La coloration de Ziehl -Neelsen s'est avérée positive chez 64, 4 % de nos malades.... est évoqué par le cytologiste, la coloration de Ziehl-Neelsen est restée négative.... (source : linkinghub.elsevier)
- La coloration de Ziehl-Neelsen est utilisée pour colorer : ? les levures ? les protozoaires ? les bactéries acido-alcoolo-résistantes... (source : pedagogie.ac-montpellier)
- de Ernest Jawetz, Joseph L Melnick, Edward A... - 1973 - Medical microbiology - 629 pages Les frottis sont colorés par la coloration de Gram et , à l'occasion, par celle de Ziehl -Neelsen. La coloration de Ziehl-Neelsen est spécifiquement... (source : books.google)
La coloration de Ziehl-Neelsen est une méthode de coloration donnant la possibilité l'identification des mycobactéries au microscope. Elle fait partie des colorations qui mettent en évidence l'acido-alcoolo-résistance, caractère essentiel des mycobactéries, en prenant en compte la difficulté de pénétration des colorants.
Ce type de coloration comporte trois temps :
- l'application d'un colorant énergique à chaud ou à froid ;
- les décolorations successives par un acide fort puis à l'alcool à 90°;
- une recoloration de contraste.
Le premier colorant utilisé dans les techniques classiques est la fuchsine concentrée. Un fluorochrome, l'auramine, est quant à lui utilisé pour les techniques en fluorescence.
Coloration de Ziehl-Neelsen
La technique décrite ici est la technique classique de référence. Cependant, elle est de moins en moins utilisée à cause des risques qu'elle fait prendre au manipulateur. En effet, les colorants tels que la fuchsine sont hautement toxiques et cancérigènes, tout spécifiquement quand ils sont utilisés à chaud (à cause des vapeurs).
- 1er temps : coloration par la fuchsine à chaud
- On recouvre le frottis d'un papier filtre imprégné de fuchsine de Ziehl.
- Chauffage à émission de vapeur pendant dix minutes au moins, en veillant à ne pas laisser sécher le papier. Rinçage à l'eau distillée stérile.
- 2e temps : décoloration
- 3e temps : recoloration
- On recouvre la lame pendant deux minutes d'une solution de bleu de méthylène, puis on rince.
L'observation s'effectue au microscope optique, avec objectif à immersion. Les mycobactéries apparaissent alors comme des bacilles rouges sur fond bleu-gris.
Techniques de coloration alternatives
Il existe actuellement des colorations alternatives inspirées de la technique de la coloration de Ziehl-Neelsen, mais présentant des risques moindres pour les manipulateurs :
- la coloration de Kinyoun (modifiée)
- la coloration à l'auramine
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