Gram négatif

Les bactéries à Gram négatif sont mises en évidence par une technique de coloration nommée coloration de Gram. Les bactéries à Gram négatif apparaissent alors roses au microscope.



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Les bactéries à Gram négatif sont mises en évidence par une technique de coloration nommée coloration de Gram. Les bactéries à Gram négatif apparaissent alors roses au microscope. La technique de coloration repose sur les caractéristiques membranaires et de paroi de la bactérie. La coloration de Gram est un facteur déterminant dans la taxonomie (classification) bactérienne.

Des bactéries Gram - (Escherichia coli)

Principe de coloration des Gram négatif

Après fixation des bactéries sur une lame (deux méthodes envisageables : fixation à l'éthanol à 90° (5 minutes) ou par passage de la lame dans la flamme, dite frottis)  :

La lame est ensuite récupérée, rincée et séchée, puis observée au microscope optique le plus souvent à l'objectif x100 + huile à immersion. Les bactéries Gram négatif apparaîtront en rose. L'observation de leur couleur est le plus souvent accompagnée de descriptions structurelles (ex. bacille ou coque).

Description de l'enveloppe

Les bactéries Gram négatif ont une structure qui s'organise en trois grandes parties, soit, de l'extérieur vers l'intérieur,  :

  • La membrane externe,
  • L'espace périplasmique, comportant surtout la paroi,
  • La membrane plasmique.

La membrane externe est en contact direct avec le milieu extérieur. Elle est essentiellement composée de phospholipides organisés en bicouche (partie hydrophile à l'extérieur et partie lipophile à l'intérieur) mais contient aussi de nombreuses protéines intrinsèques, surtout les protéines de transports nommées porines. Énormément de bactéries Gram négatif (par exemple Salmonella) possèdent aussi un composé non protidique nommé lipopolysaccharide ou LPS ; ce composé peu immunogène, dont le pouvoir pathogène (lipide A) est inclus dans la membrane externe, s'active lors de la lyse de la bactérie. La membrane externe est reliée au peptidoglycane par la lipoprotéine de Braun.

L'espace périplasmique est un espace de stockage d'enzymes, de nutriments... Il a énormément d'autres fonctions, surtout dans certaines étapes de la synthèse des protéines et dans le métabolisme. Il se situe entre la membrane externe et la membrane plasmique et il contient une couche de peptidoglycanes. La couche de peptidoglycane (appelé aussi muréine) est assez mince chez les Gram négatif contrairement aux Gram positif.

La membrane plasmique est comparable à la membrane externe (excepté le LPS). Elle possède des protéines poreuses aboutissant dans l'espace périplasmique (synthèse des protéines). La membrane plasmique contient de nombreux autres complexes protéiques d'une importance vitale pour la bactérie (comme l'ATP synthase) qui ont des rôles prépondérants dans le métabolisme bactérien.

Exemples de bactéries Gram négatif

Voir aussi

  • Les mycobactéries : une exception car non colorable par la méthode de Gram car acido-alcoolo-résistantes.
Voir coloration de Ziehl-Neelsen.

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